臨床質(zhì)譜代謝內(nèi)標使用過程的具體步驟分析
更新時間:2024-06-20 點擊次數(shù):135次
臨床質(zhì)譜代謝內(nèi)標是指在樣品制備、分析過程中加入的已知量的穩(wěn)定同位素標記的或結(jié)構(gòu)類似的化合物。它們在樣品處理和分析過程中的行為與被測物質(zhì)相似,因此可以用于校正樣品處理過程中的誤差,如體積偏差、溶劑蒸發(fā)、萃取效率變化等。在質(zhì)譜分析中,內(nèi)標主要用于校正儀器信號的漂移和基質(zhì)效應(yīng),提高定量分析的準確性和精確性。
1.化學性質(zhì)穩(wěn)定:內(nèi)標應(yīng)具有足夠的化學穩(wěn)定性,在樣品處理和分析過程中保持穩(wěn)定。
2.與目標代謝物相似:內(nèi)標的化學結(jié)構(gòu)和物理性質(zhì)應(yīng)與目標代謝物相似,以確保它們在樣品處理過程中的行為一致。
3.同位素標記:常用的內(nèi)標是穩(wěn)定同位素標記的代謝物,如同位素稀釋質(zhì)譜法(IsotopeDilutionMassSpectrometry,IDMS)中使用的內(nèi)標。
4.無生物活性:內(nèi)標不應(yīng)具有任何生物活性,以避免干擾生物體內(nèi)的正常代謝過程。
5.商業(yè)可獲得性:內(nèi)標應(yīng)易于從商業(yè)渠道獲得,以保證實驗的順利進行。
在臨床質(zhì)譜代謝分析中,內(nèi)標的使用包括以下幾個步驟:
1.內(nèi)標選擇:根據(jù)目標代謝物的性質(zhì)選擇合適的內(nèi)標。
2.內(nèi)標添加:在樣品處理的早期階段添加內(nèi)標,以確保在整個分析過程中都能對其進行跟蹤。
3.樣品處理:內(nèi)標與樣品一起經(jīng)歷相同的提取、凈化和衍生化等步驟。
4.質(zhì)譜分析:內(nèi)標與目標代謝物一同進入質(zhì)譜儀進行分析。
5.數(shù)據(jù)分析:利用內(nèi)標的信號對目標代謝物的信號進行校正,以獲得準確的定量結(jié)果。